{"id":143,"date":"2013-07-26T19:11:09","date_gmt":"2013-07-26T18:11:09","guid":{"rendered":"http:\/\/wdb.ugr.es\/~fqm302\/blog\/?p=143"},"modified":"2013-07-26T19:11:09","modified_gmt":"2013-07-26T18:11:09","slug":"micotoxinas-aproximaciones-analiticas-y-metabolomicas","status":"publish","type":"post","link":"https:\/\/wpd.ugr.es\/~fqm302\/blog\/?p=143","title":{"rendered":"Micotoxinas: aproximaciones anal\u00edticas y metabol\u00f3micas"},"content":{"rendered":"

Las micotoxinas son metabolitos secundarios t\u00f3xicos, de composici\u00f3n variada, producidos por diferentes hongos. Suelen contaminar alimentos, piensos, o las materias primas utilizadas para su elaboraci\u00f3n, pudiendo afectar a la salud tanto de humanos como de animales. Debido a su gran variedad de efectos t\u00f3xicos, y sobre todo a su extrema resistencia al calor (termorresistencia), la presencia de micotoxinas en los alimentos es considerada de alto riesgo.<\/p>\n

La contaminaci\u00f3n de los alimentos con micotoxinas depende de las condiciones ambientales, que pueden propiciar el crecimiento del hongo y por ende la producci\u00f3n de las toxinas. Por tanto, la mayor\u00eda de los productos agr\u00edcolas pueden ser susceptibles de contaminaci\u00f3n casi en cualquier momento, desde su producci\u00f3n en el campo, durante la cosecha, en el transporte y en el almacenamiento.<\/p>\n

Como resultado, la legislaci\u00f3n a nivel europeo sobre seguridad alimentaria es cada vez m\u00e1s restrictiva en cuanto a los niveles de micotoxinas en alimentos y ha establecido contenidos m\u00e1ximos de estos compuestos que no deben ser superados con objeto de garantizar la calidad del producto y permitir su distribuci\u00f3n y consumo.<\/p>\n

Considerando las recientes e importantes mejoras de las t\u00e9cnicas separativas en cuanto a miniaturizaci\u00f3n y aumento de la eficacia, y con objeto de explorar sus indudables ventajas (bajo consumo de disolventes, alta sensibilidad, elevada resoluci\u00f3n, tiempos de an\u00e1lisis reducidos y baja cantidad de muestra), en esta Tesis Doctoral se proponen nuevos m\u00e9todos anal\u00edticos para la determinaci\u00f3n de micotoxinas empleando t\u00e9cnicas de separaci\u00f3n miniaturizadas (CE y HPLC capilar) y de alta eficacia (UHPLC) con objeto de explorar las ventajas mencionadas. Estas t\u00e9cnicas, acopladas a sistemas de detecci\u00f3n altamente sensibles y selectivos, como LIF o MS\/MS, permiten la cuantificaci\u00f3n e identificaci\u00f3n inequ\u00edvoca de estos compuestos a las bajas concentraciones esperadas en estas matrices.<\/p>\n

Por otro lado, es de gran importancia disponer de t\u00e9cnicas que permitan el estudio del metaboloma de los hongos implicados en la producci\u00f3n de micotoxinas y otros metabolitos secundarios, para conocer los genes productores o para determinar nuevos metabolitos, lo que podr\u00eda ayudar a desarrollar estrategias para evitar la aparici\u00f3n de micotoxinas. En esta Tesis, se han empleado HRMS y MSn<\/sup> para el estudio del metaboloma de varios hongos.<\/p>\n

A continuaci\u00f3n se describe brevemente el trabajo desarrollado:<\/p>\n

    \n
  1. En el primer cap\u00edtulo se describe el m\u00e9todo desarrollado para la determinaci\u00f3n de las aflatoxinas B1, B2, G1 y G2 en muestras de arroz utilizando la cromatograf\u00eda capilar electrocin\u00e9tica micelar (MEKC) con detecci\u00f3n LIF y preconcentraci\u00f3n
    \nonline.<\/p>\n<\/li>\n
  2. En el segundo cap\u00edtulo se ha llevado a cabo una comparaci\u00f3n de diversos tratamientos de muestra para la determinaci\u00f3n de ocratoxina A en diferentes tipos de vino, como son la microextracci\u00f3n l\u00edquido – l\u00edquido dispersiva (DLLME) empleando disolventes org\u00e1nicos y l\u00edquidos i\u00f3nicos como extractantes (IL-DLLME), y la metodolog\u00eda QuEChERS (acr\u00f3nimo formado a partir de los t\u00e9rminos en ingl\u00e9s: R\u00e1pido, Eficaz, Barato, F\u00e1cil, Robusto, Seguro). En este caso, la t\u00e9cnica instrumental empleada ha sido la HPLC capilar – LIF, a\u00f1adiendo a la fase m\u00f3vil un medio micelar ani\u00f3nico para aumentar la intensidad de la fluorescencia y mejorar la eficacia.\n<\/p>\n<\/li>\n
  3. En el cap\u00edtulo tercero se ha llevado a cabo la determinaci\u00f3n de 15 micotoxinas (incluyendo aflatoxinas, fumonisinas, tricotecenos, ocratoxina A, citrinina, esterigmatocistina y zearalenona) en cardo mariano (Silybum marianum). Para ello, se ha utilizado UHPLC – MS\/MS para el an\u00e1lisis instrumental, mientras que el tratamiento de la muestra consisti\u00f3 en un primer paso basado en el procedimiento QuEChERS, que permit\u00eda la determinaci\u00f3n de 5 micotoxinas (fumonisina B1, fumonisina B2, nivalenol, deoxinivalenol y fusarenona -X) y una posterior limpieza basada en la DLLME para la determinaci\u00f3n del resto de las micotoxinas.\n<\/p>\n<\/li>\n
  4. Para demostrar el potencial de la UHPLC – MS\/MS junto con el tratamiento de muestra QuEChERS, en el cuarto cap\u00edtulo se han desarrollado y caracterizado dos m\u00e9todos sensibles, simples y r\u00e1pidos para la determinaci\u00f3n de 15 micotoxinas (aflatoxina B1, aflatoxina B2, aflatoxina G1, aflatoxina G2, ocratoxina A, fumonisina B1, fumonisina B2, nivalenol, deoxinivalenol, fusarenona – X, toxina T-2 y HT-2, citrinina, esterigmatocistina y zearalenona) en cereales (espelta, arroz blanco, arroz integral y arroz rojo) y pseudocereales (trigo sarraceno, quinoa y amaranto) y de 10 micotoxinas (ocratoxina A, fumonisina B1, fumonisina B2, deoxynivalenol,
    \nfusarenona – X, toxina T-2 y HT-2, citrinina, esterigmatocistina y zearalenona) en melazas (de arroz, trigo y cebada).<\/p>\n<\/li>\n
  5. El cap\u00edtulo quinto describe un m\u00e9todo de an\u00e1lisis para la determinaci\u00f3n de 14 micotoxinas en muestras de frutos secos (almendras, cacahuetes, semillas de girasol, semillas de calabaza, nueces, nueces de macadamia, pistachos, avellanas y pi\u00f1ones). De forma similar al cap\u00edtulo tercero, el tratamiento de muestra comprende una primera etapa basada en el procedimiento QuEChERS para la determinaci\u00f3n de las fumonisinas B1 y B2, deoxinivalenol, fusarenona – X, toxinas T-2 y HT-2, citrinina, esterigmatocistina, zearalenona y ocratoxina A y una posterior etapa de limpieza basada en la DLLME para la determinaci\u00f3n de las aflatoxinas (B1, B2, G1 y G2).\n<\/p>\n<\/li>\n
  6. En cap\u00edtulo sexto, se ha desarrollado un nuevo enfoque basado en cromatograf\u00eda de l\u00edquidos (LC) acoplada a HRMS y LC-MSn<\/sup>, para la identificaci\u00f3n de alcaloides erg\u00f3ticos nuevos o poco explorados en muestrasde cereales.\n<\/p>\n<\/li>\n
  7. Finalmente, en el \u00faltimo cap\u00edtulo se han determinado los metabolitos producidos por el cluster 27 pks <\/em>(pks<\/em>27) en el Aspergillus flavus usando LC-HRMS y LC-MSn<\/sup>. Asimismo, se ha estudiado por primera vez el patr\u00f3n de fragmentaci\u00f3n de estos compuestos usando ionizaci\u00f3n por electrospray en modo negativo. Este trabajo, junto con el correspondiente al cap\u00edtulo sexto, han sido llevados a cabo en la Facultad de Ciencias Farmac\u00e9uticas de la Universidad de Gante (B\u00e9lgica).<\/li>\n<\/ol>\n","protected":false},"excerpt":{"rendered":"

    Las micotoxinas son metabolitos secundarios t\u00f3xicos, de composici\u00f3n variada, producidos por diferentes hongos. Suelen contaminar alimentos, piensos, o las materias primas utilizadas para su elaboraci\u00f3n, pudiendo afectar a la salud tanto de humanos como de animales. Debido a su gran … Continue reading →<\/span><\/a><\/p>\n","protected":false},"author":2,"featured_media":0,"comment_status":"closed","ping_status":"closed","sticky":false,"template":"","format":"standard","meta":{"footnotes":""},"categories":[54],"tags":[],"class_list":["post-143","post","type-post","status-publish","format-standard","hentry","category-theses"],"_links":{"self":[{"href":"https:\/\/wpd.ugr.es\/~fqm302\/blog\/index.php?rest_route=\/wp\/v2\/posts\/143","targetHints":{"allow":["GET"]}}],"collection":[{"href":"https:\/\/wpd.ugr.es\/~fqm302\/blog\/index.php?rest_route=\/wp\/v2\/posts"}],"about":[{"href":"https:\/\/wpd.ugr.es\/~fqm302\/blog\/index.php?rest_route=\/wp\/v2\/types\/post"}],"author":[{"embeddable":true,"href":"https:\/\/wpd.ugr.es\/~fqm302\/blog\/index.php?rest_route=\/wp\/v2\/users\/2"}],"replies":[{"embeddable":true,"href":"https:\/\/wpd.ugr.es\/~fqm302\/blog\/index.php?rest_route=%2Fwp%2Fv2%2Fcomments&post=143"}],"version-history":[{"count":0,"href":"https:\/\/wpd.ugr.es\/~fqm302\/blog\/index.php?rest_route=\/wp\/v2\/posts\/143\/revisions"}],"wp:attachment":[{"href":"https:\/\/wpd.ugr.es\/~fqm302\/blog\/index.php?rest_route=%2Fwp%2Fv2%2Fmedia&parent=143"}],"wp:term":[{"taxonomy":"category","embeddable":true,"href":"https:\/\/wpd.ugr.es\/~fqm302\/blog\/index.php?rest_route=%2Fwp%2Fv2%2Fcategories&post=143"},{"taxonomy":"post_tag","embeddable":true,"href":"https:\/\/wpd.ugr.es\/~fqm302\/blog\/index.php?rest_route=%2Fwp%2Fv2%2Ftags&post=143"}],"curies":[{"name":"wp","href":"https:\/\/api.w.org\/{rel}","templated":true}]}}